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氯膦酸鹽脂質體Clodronate Liposomes清除巨噬細胞仍是優選

更新時間:2023-04-23   點擊次數:22次

巨噬細胞是先天性免疫系統的重要組成部分之一,具有促進損傷愈合、產生活性氧物質和吞噬異物的作用,其功能異常可引起機體免疫反應失調或組織病理性損傷。巨噬細胞有組織定居型(駐留)非組織定居型(招募)兩種細胞群體,其共有的顯著特征主要是具有分泌功能,包括分泌具有廣泛生物學功能的細胞因子、生長因子、免疫炎癥因子和趨化因子等。

巨噬細胞的另一特征是能夠表達特定的細胞表面標志物如F4/80、CD68、iNOS和CD206等。非組織駐留的巨噬細胞主要分布于循環系統內,而駐留型巨噬細胞則主要存在于各個組織器官中,如神經系統的小膠質細胞、肝臟Kupffer細胞、皮膚朗格漢斯細胞和腹腔的巨噬細胞等。

巨噬細胞的分化、增殖和極化依賴于特定的生長因子及其受體。巨噬細胞的表型受到其周圍微環境的影響,目前已鑒定出兩類極化表型的巨噬細胞:M1和M2表型細胞。M1表型細胞,也被稱為經典激活的巨噬細胞,表達iNOS,釋放促炎細胞因子,如TNFα、IL-1b、IL-6和IL-12;而M2型巨噬細胞,即交替激活的巨噬細胞,表達CD206和Arg-1,負責釋放抗炎細胞因子,如IL-10。切記,M1和M2是為了研究方便,定義的巨噬細胞狀態天平的兩個端。實際研究實驗中,沒有這么絕對。而是動態變化的。

巨噬細胞表型與功能活性的這種多樣性和復雜性,使得巨噬細胞的體內生物學研究存在一定困難。為解決這一問題,近年采用了一種稱為巨噬細胞耗竭/清除的方法來進行研究。巨噬細胞耗竭/清除實際上是一種采用理化(GdCl3,Clodronate Liposomes)或遺傳學技術(基因敲除小鼠),以及抗體(CSF-1抗體)將巨噬細胞去除的方法。這些方法現已廣泛用于研究巨噬細胞在動物疾病模型中的作用和免疫病理或炎癥損傷機制,也開始用于某些疾病模型如移植排異、腫瘤和疾病模型等的治療研究。

脂質體是具有雙層磷脂膜結構。其生物相容性好,不會引起抗原、熱原、過敏和毒性反應,易被生物降解,能夠封裝活性藥物,因此被作為載體廣泛地應用于藥物遞送。其中,氯膦酸鹽脂質體法Clodronate Liposomes是目前廣泛認可的巨噬細胞耗竭方法。自從荷蘭科學家Nico van Rooijen于1983年發明clodronate liposomes以來,其迅速取代GdCl3和抗體,以及基因敲除小鼠,成為廣泛認可的清除單核巨噬細胞的方法。目前荷蘭liposoma品牌(國內辦事處:靶點科技)的產品氯膦酸鹽脂質體Clodronate Liposomes,巨噬細胞清除套裝,貨號CP-005-005,已經頻繁被國際頂刊cell、naturesciences引用。

在體內,脂質體包裹的氯膦酸鹽可被巨噬細胞吞噬并攝入細胞內,此時細胞內的溶酶體磷脂酶會消化磷脂雙層,釋放其中的氯膦酸鹽分子。細胞內的氯膦酸鹽達到某一閾值濃度時,可抑制ATP依賴性酶,損害并破壞細胞能量代謝,導致巨噬細胞凋亡。此外,氯膦酸鹽半衰期很短,也難以透過細胞膜,對非吞噬細胞無明顯毒性作用,故通過選擇給藥途徑可以獲得器官特異性的巨噬細胞消耗。例如,皮下注射氯膦酸鹽脂質體能夠耗竭小鼠引流淋巴結中的巨噬細胞;靜脈注射氯膦酸鹽脂質體可以耗竭肝臟、脾、骨髓和血液中的巨噬細胞;鼻腔吸入或者氣管可以清除肺臟巨噬細胞,尤其肺泡巨噬細胞。氯膦酸鹽脂質體對巨噬細胞耗竭維持時間是一過性。清除達峰后,顧上還會源源不斷的補充。為了達到較長期限清除巨噬細胞的目的,需要采用多次注射的方式來解決。但是,長期多次的注射,對注射方式也是考驗,此外,機體體內,是否有代償反應,也需要關注。

氯膦酸鹽脂質體Clodronate Liposomes清除巨噬細胞仍是優選





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